O 2º ANTÍDOTO – ARTIGO DA CIENTISTA DRA. LIJI THOMAS

A pandemia da doença 2019 do coronavírus (COVID-19), causada pelo micróbio patogênico do coronavírus 2 da Síndrome Respiratória Aguda Grave (SARS-CoV-2), causou sobre esta humanidade 123,7 milhões de  casos e quase 4 milhões de mortes no mundo inteiro. Na ausência dos antivirais eficazes, seu tratamento e prevenção foram limitados às modalidades terapêuticas gerais e às intervenções não-farmacêuticas, apesar da pesquisa intensiva visada desenvolvendo melhores drogas.

Um estudo novo e emocionante que apareceu recentemente no server do bioRxiv* descreve um inibidor específico do vírus encontrado em um extrato do dente-de-leão, uma planta comum que poderia fornecer uma nova e frutuosa pesquisa da droga.

Variações de interesse surgidas recentemente

O vírus SARS-CoV-2 submeteu-se a um grande número mutações durante o período pandêmico. Recentemente, três que espalham rápida e, em alguns casos, mais virulentos, tensões do vírus emergiram.

Estes são sabidos como o Reino Unido (variação B.1.1.7), para o sul – africano (variação B.1.351) e Brasil (variação P.1). Todos compartilham da mutação de definição N501Y da proteína Spike. Todos os três desceram de uma tensão mais adiantada que leva a mutação do ponto de D614G que se tornou rápida dominante.

O sul – a variação africana leva outras duas mutações importantes do ponto, K417N e E484K. Os resultados adiantados indicaram que a mutação de D614G pôde ser associada com as taxas de fatalidade mais altas, quando a mudança conformacional na proteína do ponto poderia conduzir a uma infectividade mais alta.

Efeitos de mutações do VOC

As mutações de N501Y e de K417N parecem ter a energética favorável durante suas interações com o receptor da célula de anfitrião para o vírus, a enzima de conversão 2 (ACE2), sugerindo uma possibilidade de uma infectividade mais alta.

A mesma tendência é considerada durante interações entre a proteína do ponto e um anticorpo de neutralização natural isolados dos pacientes COVID-19. Isto levanta interesses importantes sobre se a resposta imune permanece protetora contra estas variações mais novas.

Estas variações igualmente mostram a resistência à neutralização por anticorpos existentes, na maior parte devido à mutação de E484K.

Alvos do estudo

Em virtude disto, a terapêutica que visa as interações spike-ACE2 pode ser uma linha bem sucedida de estudo. O estudo atual centra-se sobre a inibição do emperramento das proteínas spike-ACE2 através do domínio receptor-obrigatório do ponto (RBD) no contexto do ponto D614, da mutação de D614G, da mutação de N501Y, e da mutação tripla K417N, E484K, e N501Y.

O dente-de-leão comum (officinale do Taraxacum) é um constante, nativo às zonas temperadas mornas no hemisfério Norte, e distribuído extensamente através das margens da estrada, dos campos, dos jardins e de todos os outros espaços abertos onde é permitido para crescer.

É uma planta comestível e tem uma reputação na Europa como uma planta medicinal, é muito útil no tratamento das doenças que afetam o fígado e a vesícula biliar, o intestino, e as junções. Sua segurança foi o assunto de muitas monografias novas. No deste site; Ela é encontrada em todo Brasil. Ela é tão comum que é considerada como mato, por tamanha proliferação e fácil de encontrar.

Esta planta contém terpenos, phenolics que incluem coumarins e flavonóides, e polisacáridos. O composto fenólico o mais abundante era ácido chicoric. As raízes contêm uma abundância da inulina não-solúvel do polisacárido.

Inibição da ligação spike-ACE2

A administração de extratos água-baseados das folhas da planta foi encontrada para ser associada com a inibição eficiente e dependente da dose de proteína do ponto ao receptor ACE2, quando adicionada antes ou depois da incubação dos dois.

Uma planta relacionada, intybus do Cichorium, igualmente inibiu esta interação mas não foi tão poderosa. A concentração em que estas foram observadas para ser eficazes contra 50% das interações spike-ACE2 (concentração eficaz de 50%, EC50) era 12 mg/mL e 30 mg/mL, respectivamente.

Os efeitos inibitórios foram seguidos à elevação – compostos bioativos do peso molecular no extrato.

Inibição da ligação de superfície das células-ponto

Os pesquisadores igualmente observaram que as células do pulmão na cultura, expressando a proteína ACE2 da pilha de anfitrião, não ligaram o ponto quando incubadas com o extrato primeiramente. Ela foi reduzida por 77%, quando a elevação – a fração do peso molecular apenas obstruiu a ligação em 63%.

A inibição continuada em 50% foi observada em 3 horas, e em 37% para o extrato da chicória.

Efeitos de mutações diferentes na ligação das células-ponto

Quando as células cultivadas foram desafiadas com o ponto D614 e suas variações, a afinidade obrigatória do ponto à superfície ACE2 foi aumentada pela dobra aproximadamente 1,5 e pelo 3-4-fold com as mutações de D614G e de N501Y, respectivamente. Se a célula foi tratada de antemão com o extrato do officinale do T., havia uma inibição rápida de spike-ACE2 que liga dentro de 30 segundos. A taxa da inibição era aproximadamente 60% para a variação D614, mas aumentado a 88% com ambas as mutações acima.

Com extrato da folha da chicória, a inibição obrigatória era menos poderoso por 30-70% para as variações diferentes. O efeito era ainda mais fraco na temperatura corporal.

Quando adicionada a cargo-incubação, o extrato foi encontrado para deslocar rápida o ponto do complexo do ponto-receptor por 50%, em média, quando a chicória deslocou um quarto de proteína encadernada do ponto. Estes resultados foram replicados na cultura de células humanas.

Células de ACE2-TMPRSS2-expressing

O estudo igualmente envolveu avaliar o emperramento do ponto ao receptor ACE2 nas células humanas do pulmão que expressam ACE2 e o protease TMPRSS2 do serine, que é essencial para a fusão ponto-negociada da vírus-membrana. Interessante, quando adicionado a estas células, o extrato da chicória mostrou uma inibição obrigatória mais poderoso.

O pré-tratamento com o extrato conduziu à inibição de 75% de ligação com officinale do T. e de 56% para o extrato da chicória. O IC50 era 1,7 mg/mL.

O tratamento da Cargo-incubação conduziu aos resultados comparáveis para D614 e D614G, mas a uma eficiência um tanto mais baixa da inibição para N501Y. O ponto triplo da mutação igualmente mostrou a mesma inibição na presença do extrato do dente-de-leão, com inibição de aproximadamente 80% independentemente da época do tratamento do extrato.

Efeitos na viabilidade da célula e na estabilidade do extrato

Estes extratos permaneceram estáveis na saliva e reduziram significativamente a expressão da proteína ACE2, apenas como o ponto. A atividade catalítica da enzima ACE2 era não enfraquecida na presença do extrato em 24 horas, e a viabilidade da célula permaneceu inalterada após 84 horas.

Inibição do Pseudovírus

Os resultados igualmente mostraram que o extrato do dente-de-leão obstruiu a entrada viral em pilhas, usando um lentivírus pseudotipado que expressa o ponto SARS-CoV-2, por aproximadamente 85% em uma concentração de 20 mg/ml, e por 70% na metade desta concentração.

Isto foi acompanhado dos efeitos anti-inflamatórios, como refletido por níveis inferiores da citocina inflamatória poderosa (IL) interleucina-6 nas células de ACE2/TMPRSS2-expressada.

Quais são as implicações?

Os compostos naturais poderiam render a terapêutica antiviral eficaz e segura e ter sido relatados por muitas décadas. Os compostos como o clicirrizina mostram a inibição do receptor ACE2. Contudo, podem igualmente produzir a oclusão incompleta do motivo do contacto de RBD, assim impedindo o emperramento spike-ACE2.

Os inibidores sintéticos de ACE2 que liga como n (2-aminoethyl) – 1 aziridina-etanamina (NAAE) igualmente mostram o mesmo comportamento. O dalbavancina antibiótico liga ACE2 e inibe o emperramento spike-ACE2, e a infecção eficazmente inibida por este vírus no rato e em modelos não-humanos do primata.

O extrato da casca da romã igualmente mostrou a inibição de 74% desta interação, e a obstrução da entrada viral em células humanas do rim na cultura.

O extrato do dente-de-leão move-se além deste, com a inibição poderoso do emperramento spike-ACE2, confirmada pela inibição do ligamento de superfície de ACE2-cell em duas linha celular humanas diferentes.

O estudo igualmente mostra que as variações D614G e a mostra de N501Y aumentaram força obrigatória ao receptor ACE2 de células humanas. Isso não é refletido na força reduzida da inibição pelo extrato do dente-de-leão, pela cargo-incubação.

Estes que são umas tensões mais infecciosas, tal eficácia mostrada pelo extrato mostram a grande promessa contra a infecção por variações do interesse.

A margem de segurança alta é uma recomendação adicional, com uma dosagem de 4-10 g, 1-3 vezes por dia, e nenhum caso relatado da sobredosagem até agora. Poucas contra-indicações existem mas incluem a hipersensibilidade, as doenças do intervalo biliar, ou a doença ativa da úlcera péptica. O extrato do dente-de-leão é igualmente alto no potássio que pode potencial causador da hipercalemia.

A desregulação de ACE2 nas células que seguem o tratamento com este extrato exige uma pesquisa adicional para explorar seu impacto potencial na fisiologia humana. Contudo, este extrato podia ser usado para obstruir o vírus que liga à mucosa oral, por exemplo, após a exposição a um caso COVID-19.

Isto explora o bloqueio rápido observado do emperramento da vírus-célula e o deslocamento do ponto dos complexos spike-ACE2 já formados. As experiências da célula sublinham a importância desta atividade.

“Os fatores tais como a baixa toxicidade nos seres humanos e em uma inibição obrigatória eficaz de cinco mutações relevantes do ponto ao receptor ACE2 humano, como relatado aqui in vitro, incentivam para uma análise mais detalhada dos officinales’ eficácia do T. na prevenção SARS-CoV-2.”

Observação *Importante

O bioRxiv publica os relatórios científicos preliminares que são revistos e, não devem consequentemente ser considerados como conclusivos, guia a prática clínica/comportamento saúde-relacionado, ou tratado como a informação estabelecida.