Pesquisador Walter Castanha
Quercetina e curcumina podem prevenir e tratar a fusão de células, que pode estar levando a mortes cardíacas súbitas e problemas neurológicos devido à proteína spike.
A expressão da espícula S e seu receptor hACE2 induzem a fusão de neurônios murinos em cultura.
a- Imagens representativas de neurônios fundidos (primeira fileira), ou neurônios de controle não fundidos (outras linhas). Duas populações de neurônios hipocampais expressando uma combinação de dois plasmídeos como indicado à esquerda (spike S e GFP, hACE2 e mCherry, vetor vazio e GFP, ou vetor vazio e mCherry) foram cultivadas juntas por 7 dias (7 DIV). Imunocitoquímica para núcleos (azul), MAP2 (magenta), GFP (verde) e mCherry (vermelho). A fusão neuronal só ocorreu (primeira linha) quando uma população de neurônios foi transfectada com spike S e GFP, e a outra com hACE2 e mCherry, como visualizado pela presença de GFP e mCherry nos mesmos neurônios (amarelo no painel de mesclagem).
b- Quantificação da fusão neuronal como a porcentagem de neurônios que se fundem (amarelo) quando dois neurônios estão próximos ( ≤ 200 μm).
c- Imagens representativas de neurônios fundidos (primeiro painel), ou neurônios não fundidos (segundo e terceiro painéis). Duas populações de neurônios hipocampais expressando uma combinação de dois plasmídeos como indicado acima das imagens (spike S e GFP, hACE2 e mCherry, spike S-2P e GFP, ou spike S-6P e GFP) foram cultivadas juntas por 7 dias (7 DIV). Imunocitoquímica para núcleos (azul), MAP2 (magenta), GFP (verde) e mCherry (vermelho). A fusão neuronal só ocorreu (primeiro painel) quando a proteína espícula S WT foi transfectada, como visualizado pela presença de GFP e mCherry nos mesmos neurônios (amarelo no painel), e não quando qualquer um dos mutantes não fusogênicos (spike S-2P, spike S-6P) foram usados (segundo e terceiro painéis).
d- Quantificação da fusão neuronal como a porcentagem de neurônios que se fundem (amarelo) quando dois neurônios estão em proximidade ( ≤ 200 μm). Os dados em b e d foram apresentados como média ± EPM, n > 200 neurônios analisados em 4-6 placas independentes de 2 dissecções, teste ANOVA one-way de Kruskal-Wallis em e seguido do teste post hoc de Dunn comparando todos os grupos com o grupo sem espícula S ou hACE2. **p <0,01, ***p <0,001.
Se você tem lido meus posts recentes, saberá que acredito que a fusogenicidade da proteína spike do SARS-CoV-2 pode ser responsável por grande parte da morte súbita cardíaca e problemas neurológicos observados. De fato, a proteína spike causa fusão entre neurônios e células gliais.
Numerosos vírus envelopados usam moléculas de superfície especializadas chamadas fusogênios para entrar nas células hospedeiras. Durante a replicação do vírus, esses fusogênios decoram a membrana das células hospedeiras, permitindo-lhes a capacidade de se fundir com as células vizinhas, formando sincícios que os vírus usam para se propagar enquanto escapam do sistema imunológico. Muitos desses vírus, incluindo o coronavírus 2 da síndrome respiratória aguda grave (SARS-CoV-2), infectam o cérebro e podem causar sintomas neurológicos graves por meio de mecanismos que permanecem pouco compreendidos. Aqui mostramos que a expressão da proteína spike (S) do SARS-CoV-2 ou da proteína p15 do ortoreovírus babuíno é suficiente para induzir a fusão entre neurônios interconectados, bem como entre neurônios e células gliais. Esse fenômeno é observado em todas as espécies, de nematoides a mamíferos, incluindo neurônios derivados de células-tronco embrionárias humanas e organoides cerebrais. Mostramos que os eventos de fusão são progressivos, podem ocorrer entre neuritos distantes e levam à formação de sincícios multicelulares. Finalmente, revelamos que, além das moléculas intracelulares, os eventos de fusão permitem a difusão e o movimento de grandes organelas, como mitocôndrias, entre neurônios fundidos.
O que foi muito interessante nesse estudo foi que o Spike usado nas vacinas NÃO fez com que as células se fundissem, pois está na conformação de pré-fusão, bloqueando sua capacidade de fusão. No entanto, eles SÓ usaram hACE2. Além disso, Furin é capaz de clivar o pico, e ele se liga a MUITO mais do que apenas ACE2, acredito que isso precisa ser mais explorado.
Ao contrário do p15, a presença do receptor específico foi necessária para iniciar a fusão celular, pois a expressão isolada da espícula S ou hACE2 não gerou nenhum evento de fusão (fig. 3a segunda e terceira fileiras, e b). Para determinar se a fusão de neurônios foi causada pelas propriedades fusogênicas da espícula S, usamos duas versões inativas de fusão dessa proteína, a spike S-2P e a spike S-6P (HexaPro, a vacina universal Spike).
A espícula (S) do SARS-CoV-2 e o ortoreovírus p15 causam fusão neuronal e glial https://www.biorxiv.org/content/10.1101/2021.09.01.458544v1.full
A capacidade de fundir células não parece estar limitada a neurônios e células gliais. Células multinucleadas atribuídas à Spike foram encontradas nos pulmões e nas paredes vasculares dos pacientes.
Uma patologia adicional característica da doença COVID-19 foi a presença de células epiteliais anômalas. Estes foram caracterizados por citoplasma anormalmente grande e, muito comumente, pela presença de bi- de multinucleação. A presença dessas células dismórficas foi detectada nos pulmões de 20 pacientes (50%), incluindo todos os 6 pacientes que necessitaram de CI, e ocasionalmente em outros 16 pacientes (39%). Essas células estavam presentes nos espaços alveolares ou se projetavam para a parede vascular vizinha e danificada. Em vários casos, essas células se agruparam para formar áreas de metaplasia escamosa.
A persistência do RNA viral, a sincícia dos pneumócitos e a trombose são características da patologia COVID-19 avançada https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7677597/
Deve-se notar que a metaplasia escamosa é um risco para o câncer.
Como estamos descobrindo, a capacidade da Spike de fundir células também ocorre no coração, o que é a base para minha preocupação de que a fusão de cardiomiócitos é um fator importante na pletora de mortes cardíacas súbitas.
A transfecção de hiPSC-CMs com CoV-2 S-mEm produziu células gigantes multinucleadas (sincícios) exibindo aumento da capacitância celular (75±7 pF, n = 10 vs. 26±3 pF, n = 10; P<0,0001) compatível com o aumento do tamanho celular.
A fusão de cardiomiócitos mediada pela proteína spike do SARS-CoV-2 pode contribuir para o aumento do risco arrítmico na COVID-19
https://journals.plos.org/plosone/article?id=10.1371/journal.pone.0282151
Há ampla evidência provando que a proteína spike está fundindo células, potencialmente em todos os órgãos. Portanto, devemos encontrar uma maneira de tratar ou prevenir a fusão de células, para evitar potenciais danos e danos graves.
Mais uma vez, Quercetina e curcumina vêm para o resgate. Encontramos mais uma maneira que essas moléculas-maravilha são capazes de nos ajudar em nossa batalha contra esse patógeno perigoso.
QUERCETINA
Um estudo publicado em março do ano passado mostrou que a quercetina não apenas reduziu a formação de sincícios, mas também reduziu a expressão da proteína spike. Um duplo benefício.
Resultados
A transfecção de espículas em células HEK293-ACE2+ causou formação de sincícios, descamação celular e desnudamento focal da monocamada celular; transfecção em células Vero E6 também causou formação de sincícios. A expressão de espículas regulou genes potencialmente nefrotóxicos (TNF-α, MCP-1 e ICAM1). Spike upregulated o gene citoprotetor HO-1 e vias de sinalização relevantes (p-Akt, p-STAT3 e p-p38). A quercetina, um indutor de HO-1, reduziu a formação de sincícios e a expressão da proteína spike.
Interpretação
As principais conclusões do estudo são: 1) A expressão da proteína spike nas pilhas do rim fornece um modelo relevante para o estudo das respostas desadaptativas e adaptativas à IRA em COVID-19; 2) essa expressão da proteína spike regula positivamente a HO-1; e 3) quercetina, um indutor de HO-1, pode fornecer uma estratégia protetora clinicamente relevante/viável na IRA que ocorre no cenário de COVID-19.
A proteína spike do SARS-CoV-2 induz a heme oxigenase-1: implicações fisiopatológicas https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8669938/
CURCUMINA
(A) Fusão célula-célula de células A549 expressando proteína spike eGFP com células A549 expressando de forma estável o receptor ACE2 humano. A barra de escala indica 250 μm. (B) Análise quantitativa das sincicias formadas. Os experimentos foram realizados em triplicata e repetidos três vezes. Os dados são apresentados como % do controle ± DP; TF-3 –teaflavina-3,3′-digalato Δ p ≤ 0,01, * p ≤ 0,001. Controle – 0,025% DMSO, controle positivo – 20 μg/ml anticorpo anti-ACE2.
Em um estudo de junho de 2021, verificou-se que, dos polifenóis testados, a curcumina teve o maior efeito na prevenção da formação de sincícios.
Além disso, nosso experimento adicional, onde as pilhas A549 que expressam virions pseudo-tipados da proteína spike do SARS-CoV-2 foram pré-incubadas com os polifenóis testados, e então estratificadas por 4h em hCE2/A549, as pilhas mostraram uma ligação significativamente diminuída. A incubação com brasilina a 25 μg/ml diminuiu a fusão em 40%, com TF-3 em 10–25 μg/ml em 40% a 70%, e com curcumina nas mesmas concentrações, ou seja, 10–25 μg/ml, em 70% a 95%. Os resultados foram consistentes com conjuntos de dados previamente obtidos.
Os compostos fenólicos interrompem a ligação do receptor-mediado pela espícula e a entrada de pseudo-virions SARS-CoV-2 https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8211150/
Precisamos de mais estudos para determinar o melhor curso de ação no uso de compostos como quercetina e curcumina no tratamento de patologias relacionadas à Spike.
Gostaria de agradecer a Joachim Gerlach e à equipe da vedicinals.com por sua contribuição para a pesquisa deste post. Vedicinals entraram em contato comigo quando descobriram que minhas recomendações de tratamento estavam muito de acordo com suas próprias descobertas. Eles têm uma terapêutica que pode vir a ser um protocolo virtual em si. Chama-se Vedicinals9.